一种高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌的构建研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 夏树立

作者: 夏树立;韩静;王丽学;杨春蕾;刘长悦;王海亮;吴贶;史慧玲

作者机构:

关键词: 辣椒高赖氨酸基因;枯草芽孢杆菌;基因克隆;同源交换;HPLC

期刊名称: 中国农学通报

ISSN: 1000-6850

年卷期: 2020 年 030 期

页码: 98-105

收录情况: CSCD

摘要: 为了选育一种非抗性、高产出、遗传稳定性好、低生产成本的L-赖氨酸生产菌株,以辣椒花药和枯草芽孢杆菌为试验材料,以穿梭表达载体pHT43和基因敲除载体pK18mobsacB为媒介,将辣椒花药中的高赖氨酸基因CFLR转化到枯草芽孢杆菌中.经过2次细胞内同源交换和培养基筛选,最终获得不带质粒抗性标记的高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株CMCC(B)63501/pK18mobsacB-ΔALA::CFLR,该菌株连续传代20次后仍具有明显高于野生型的CFLR基因拷贝数,经HPLC验证,重组菌株L-赖氨酸含量比野生菌株提高了64.89%.结果表明,本研究所构建的非抗性高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株产量高、遗传稳定性好、低纯化成本,具有良好的应用潜力.

分类号: S816.7

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