鸡γ干扰素在酵母中的分泌表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 魏雪涛

作者： 魏雪涛;李银;刘宇卓;张敬峰

作者机构：

关键词： 鸡γ干扰素;克隆;分泌表达

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2009 年 21 卷 05 期

页码： 450-454

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank已发表的鸡γ干扰素(ChIFN-γ)cDNA基因序列设计一对引物,以ConA刺激8 h后的鸡全血淋巴细胞提取的总RNA为模板,通过RT-PCR方法克隆出ChIFN-γ基因,将其连接到pMD18-T载体上获得阳性重组质粒。测序结果表明,该ChIFN-γ与GenBank上发表的ChIFN-γ序列的同源性可达99.6%,其含有1个495 bp的开放性阅读框架,编码164个氨基酸。通过Kpn I和Not I两个酶切位点将该基因插入酵母表达载体(pPICZa-A),并将该重组酵母ChIFN-γ载体线性化,通过电转化使ChIFN-γ基因整合到酵母(X-33)基因组上,经甲醇诱导后,成功表达出ChIFN-γ。利用Western-blotting分析测定表达的ChIFN-γ蛋白的活性。结果表明,本试验得到的重组酵母ChIFN-γ是具有反应原性的蛋白。

分类号： S831

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