利用新型红酵母苯丙氨酸解氨酶制备低苯丙氨酸酪蛋白

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张阿娜

作者： 张阿娜;韩雪;谷天一;辛凤姣;王钰璐

作者机构：

关键词： 苯丙酮尿症;苯丙氨酸解氨酶;低L-Phe蛋白;催化活性;热稳定性;L-Phe转化率;特医食品

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2024 年 40 卷 008 期

页码： 309-319

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】挖掘高活性、高稳定性的苯丙氨酸解氨酶(EC 4.3.1.24;penylalanine ammonia-lyase,PAL)，为后续在制备无(低)苯丙氨酸特膳食品的应用奠定基础。【方法】从胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)和双倒卵形红酵母(Rhodotorula diobovata)中克隆到基因RmPAL和RdPAL，并通过生物信息学分析两个酶的序列和结构特征；在大肠杆菌中异源表达纯化RmPAL和RdPAL蛋白，测定最适反应条件和底物特异性；通过高效液相色谱和苯丙氨酸试剂盒测定了RmPAL和RdPAL转化酸解酪蛋白(casein acid hydrolysate,CAH)中苯丙氨酸(L-phenylalanine,L-Phe)的能力。【结果】RmPAL和RdPAL是真菌来源的PAL，分别由3个结构域组成：MIO结构域(MIO domain)、核心结构域(core domain)和屏蔽结构域(shielding domain)，活性中心具有催化氨基酸Tyr和底物特异性特征氨基酸His；RmPAL和RdPAL在溶液中均以四聚体形式存在，两个酶的最适pH和最适温度均为8.9和50℃，且具有较宽泛的pH和温度稳定性，优于黏红酵母来源的商用PAL酶；此外，两种酶均能催化L-Phe和酪氨酸(L-tyrosine,L-Tyr)反应，且对L-Phe的催化效率较高，约为L-Tyr的5倍，脱除酸解酪蛋白中L-Phe的转化率分别为88%和93%。【结论】RmPAL和RdPAL具有较强稳定性和L-Phe水解偏好性，可从食源蛋白中有效去除L-Phe。

分类号： Q78%TS201.21

  • 相关文献

[1]蛋白质工程在饲料用酶研发中的应用研究进展. 涂涛,罗会颖,姚斌. 2022

[2]来源于异形曲霉的葡萄糖氧化酶催化活性和热稳定性改良. 余尚霖,周乔,张宏海,柏映国,罗会颖,杨小军,姚斌. 2025

[3]贮藏条件对全营养乳剂型特医食品品质特性和稳定性影响. 李子琰,刘媛,刘光,邓媛元,魏振承,张雁,唐小俊,李萍,张名位. 2021

[4]宏量营养素和pH值对乳剂型特医食品基质品质的影响. 刘媛,叶盛英,魏振承,张雁,邓媛元,唐小俊,张名位,刘光. 2020

[5]唾液酸对一种特殊医学用途全营养配方食品体外消化特性的影响. 程园梦,丰珂珏,左摇,胡雄,熊文,邓乾春,陈亚淑,李翔宇. 2024

[6]链轮丝菌属谷氨酰胺转氨酶的研究进展. 起登凤,邹良平,周登博,谢江辉,陈宇丰,张妙宜. 2019

[7]低温双结构域Beta-折叠桶状植酸酶的结构与功能研究. 黄火清,李中媛,罗会颖,石鹏君,柏映国,姚斌. 2011

[8]无乳链球菌分选酶A的表达、纯化与活性检测. 张露珊,董靖,周顺,刘永涛,胥宁,杨秋红,艾晓辉. 2020

[9]iTRAQ联合LC-MS/MS技术分析痢疾杆菌耐酸性研究. 魏小娟,张继瑜,周绪正,李冰,程富胜,牛建荣,王娟娟. 2015

[10]布鲁菌半胱氨酸水解酶在甲硫氨酸循环中的催化活性研究. 徐达,吴小卡,荆雅玮,左佳坤,米荣升,黄燕,陈兆国,王成明,韩先干. 2017

[11]堇青石负载Pd-Pt型催化剂的制备及催化甲烷燃烧性能. 孙立梅,谷丽梅,王刚,朱秀娟,于滨,王宏扬,刘家磊,史和昌. 2024

[12]水杨酸对黄瓜几种酶活性及抗病性的诱导作用. 李淑菊,马德华,庞金安,霍振荣. 2000

[13]低浓度玉米小斑病菌T毒素对玉米叶片苯丙氨酸解氨酶活性的诱导研究. 马春红,李运朝,董文琦,翟彩霞,范尉尉,柳斌辉,王立安,任会芳. 2007

[14]玉米小斑病菌T小种培养滤液对玉米抗病性的诱导. 马春红,翟彩霞,王立安,陈霞,郭秀林,崔四平,李广敏. 2005

[15]冬春不同栽培环境下‘宁海白’枇杷幼果酚类物质含量与代谢的变化. 冯健君,陈俊伟,徐红霞,谢鸣,吴延军,张慧琴. 2010

[16]甘薯块根抗黑斑病酚类物质代谢的研究. 刘美艳,孙厚俊,王景景,王考艳,申杰,刘丹,张健,谢逸萍. 2012

[17]玉米小斑病菌C毒素培养滤液对玉米叶片苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的诱导效应. 商闯,马春红,李运朝,翟彩霞,董文琦,崔四平,侯立白,贾银锁. 2008

[18]不同石榴品种果皮褐变及其相关酶活性分析. 冯立娟,尹燕雷,杨雪梅,付莹,李英朋. 2017

[19]植物苯丙氨酸解氨酶表达调控机理的研究进展. 黄小贞,赵德刚. 2017

[20]乙烯利对聚乙二醇胁迫下甘蔗叶类黄酮及相关酶活性的影响. 李杨瑞,杨丽涛,丘佩玲,韦雪雪,黄颖琴. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序