半夏凝集素基因克隆及其对桃蚜的抗性研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 吴志明

作者: 吴志明;董文琦;党志红;潘文亮;谢晓亮;温春秀;陈劲枫

作者机构:

关键词: 半夏凝集素;基因克隆;转基因烟草;抗性;桃蚜

期刊名称: 南京农业大学学报

ISSN: 1000-2030

年卷期: 2010 年 33 卷 02 期

页码: 49-54

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 研究了半夏凝集素(Pinellia ternataagglutinin,PTA)基因对桃蚜(Myzus persicae)的抗性。从半夏幼叶中提取总RNA,采用RT-PCR法分离克隆出PTA1基因cDNA片段,该基因在GenBank中登录号为DQ092435。序列分析表明:该cDNA片段全长为810bp,编码269个氨基酸组成的蛋白,具有单子叶植物甘露糖凝集素基因家族的特征,含有3个由4个氨基酸(QDNY)组成的甘露糖专一结合位点,与报道的天南星科凝集素基因氨基酸序列的同源性在72.7%~92.9%。构建了35S启动子控制下的PTA1基因的植物表达载体pBI121PTA1,该载体含有抗卡那霉素的选择标记基因(nptⅡ),利用根癌农杆菌介导法转化烟草获得抗卡那霉素的植株。PCR和半定量RT-PCR分析表明:PTA1基因已经整合到植物基因组中并在转录水平上得到了有效表达。抗蚜虫鉴定表明:转基因植株有效地抑制了蚜虫的群体增长率,平均抑制率达77.02%,表明该基因对同翅目害虫的抗虫基因工程有重要的应用价值。

分类号: S336

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