玉米ZmCIPK42原核表达载体构建及蛋白纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈勋基

作者： 陈勋基;陈果;黄全生

作者机构：

关键词： 玉米;CIPK;蛋白纯化

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2013 年 50 卷 01 期

页码： 33-37

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]分析玉米ZmCIPK42序列,诱导蛋白表达,并获得纯化的蛋白。[方法]利用蛋白分析软件分析ZmCIPK42性质及磷酸化作用位点,构建ZmCIPK2-pET30a原核表达载体,用IPTG诱导蛋白表达,用NiNTA树脂纯化蛋白。[结果]ZmCIPK42具有典型的CIPK家族基因的N端激酶结构域和C端NAF调控域,激酶结构域内有较多磷酸化位点,原核表达的ZmCIPK42主要以包涵体形式存在,用Ni-NTA树脂可以纯化获得有活性的ZmCIPK42蛋白。[结论]28℃诱导后ZmCIPK42可以有活性的蛋白。用His作为标签纯化ZmCIPK42蛋白,可高效获得大量纯化蛋白。

分类号： S513

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