口蹄疫病毒多基因重组质粒的体外表达及衣壳组装

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭慧琛

作者： 郭慧琛;刘在新;孙世琪;冷青文;刘湘涛;谢庆阁

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;真核表达质粒;BHK-21;体外表达

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2005 年 21 卷 03 期

页码： 71-77

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： PCR扩增获得包含口蹄疫病毒P1、2A、3C、3D及部分2B编码区的目的基因片段P12X3C3D,将P12X3C3D经AflⅡ和XbaI双酶切后,定向克隆于真核表达质粒载体pcDNA3.1(+);另将PCR扩增获得的P12X3C3D直接与真核表达质粒载体pTARGETTM连接,进行筛选、鉴定及DNA序列分析,分别获得重组质粒pcDNA3.1/P12X3C3D、pTARGET/P12X3C3D。将重组质粒分别转染BHK-21细胞,通过双抗体夹心ELISA方法和间接免疫荧光标记方法检测细胞中表达的口蹄疫病毒抗原,用磷钨酸负染,以电子显微镜观察转染重组质粒的细胞中组装的口蹄疫病毒空衣壳。结果表明,口蹄疫病毒基因组片段正确克隆到真核表达质粒载体上,重组质粒pcDNA3.1/P12X3C3D、pTARGET/P12X3C3D均可在BHK-21细胞中表达FMDV目的蛋白。其中重组质粒pTARGET/P12X3C3D表达的口蹄疫病毒抗原蛋白,能够在细胞内正确组装成病毒空衣壳。

分类号： S852.65

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