鸭TLR2在免疫组织和血液中的表达分析及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱春红

作者： 朱春红;王志成;刘宏祥;陶志云;宋卫涛;王逸飞;徐文娟;章双杰;李慧芳

作者机构：

关键词： 鸭;dTLR2 mRNA;免疫组织;重组表达;多克隆抗体

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2024 年 39 卷 005 期

页码： 212-218

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究Toll样受体2(TLR2)在水禽如鸭先天免疫中的作用，利用荧光定量PCR分析dTLR2 mRNA在1～10周龄鸭免疫器官中表达水平以及大肠杆菌、沙门氏菌感染后血液中dTLR2 mRNA表达变化，初步解析dTLR2在鸭抗感染中的可能作用；通过体外表达鸭dTLR2胞外段，并免疫家兔获得特异性抗体以期为鸭dTLR2免疫应答研究提供生物素材。结果表明，dTLR2 mRNA在不同周龄鸭免疫器官中都有表达，脾脏和胸腺组织中，表达量在不同周龄有显著或极显著变化，但在法氏囊组织中，各周龄间表达变化差异不显著；鸭感染大肠杆菌或者沙门氏菌后，第1天及第2天感染组表达量显著高于对照组，但在第3天时，感染组和对照组表达量差异不显著。研究分析dTLR2编码基因，预测胞外区段并设计引物，构建pET28a-TLR2重组表达质粒，重组表达dTLR2-His融合蛋白。经SDS-PAGE检测表明，重组蛋白成功高效表达，分子质量约29 ku。重组蛋白经镍柱纯化并透析后免疫家兔制备抗血清；所获家兔免疫抗血清能特异性的识别重组TLR2蛋白和组织中内源性TLR2蛋白。鸭dTLR2 mRNA组织中表达分析及多克隆抗体的成功制备将为进一步研究dTLR2的生物学功能提供生物素材。

分类号： S852.4

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