南非2型口蹄疫病毒VP1蛋白单抗的制备与特性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱昱茜

作者： 朱昱茜;石正旺;罗俊聪;陈婕;林永玉;席韬;张帆;石鑫泰;郑海学;包世俊;田宏

作者机构：

关键词： 南非2型;口蹄疫病毒;VP1蛋白;特异性单克隆抗体

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2024 年 004 期

页码： 794-801

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备南非2型口蹄疫病毒型特异性单克隆抗体，本研究通过原核系统表达南非2型口蹄疫病毒VP1蛋白，亲和层析的方法纯化目的蛋白。将纯化的VP1蛋白使用弗氏佐剂乳化后，免疫BALB/c小鼠，待加强免疫后取血清效价最稳定的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞进行融合，应用间接ELISA筛选针对南非2型VP1蛋白的单克隆抗体。采用特异性试验、叠加试验和抗体亚型鉴定等方法对筛选的单克隆抗体特性进行分析。结果发现，本研究成功表达南非2型VP1蛋白，筛选出2株能稳定分泌特异性针对南非2型VP1蛋白的杂交瘤细胞株（3B2和6F2），其亚型分别为IgG2a和IgG1，叠加试验结果表明2株单抗的叠加系数>40%，说明两株单抗针对不同的抗原位点；单抗的效价可达1∶256 000，特异性试验证明2株单抗均不与O型、A型口蹄疫病毒及其他常见猪病病毒产生交叉反应。由此可见，本研究制备的单克隆抗体具有良好的特异性和反应性，为南非2型口蹄疫病毒定型诊断和未来疫苗的研制奠定了基础。

分类号： S852.65

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