转基因玉米PCR检测体系的优化研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 何春梅

作者： 何春梅;张成华;刘强;董瑞;高新学;汪黎明;刘铁山

作者机构： 山东省农业科学院玉米研究所

关键词： 转基因玉米;PCR扩增;反应体系

期刊名称： 山东农业科学

ISSN： 1001-4942

年卷期： 2011 年 06 期

页码： 14-16+19

摘要： 以转基因玉米为研究材料,从模板DNA的提取质量、Mg2+浓度、退火温度、引物用量等方面对PCR检测体系进行优化,建立了检测转基因玉米中外源基因的有效PCR反应体系。在优化体系中,25mm ol/LMg2+用量由1.5μl降低为1.2μl,12.5mm ol/L引物用量由1μl降低为0.5μl,退火温度提高2℃。TouchDown PCR反应条件:95℃5m in;95℃1m in,62.5℃1m in(以后每个循环递减1℃),72℃1m in,循环15次;95℃1m in,57.5℃1m in,72℃1m in,循环20次;72℃延伸7m in。

分类号： S513

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