亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其免疫活性的初步分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 董金杰

作者： 董金杰;王永录;张永光;伏小平;潘丽;方玉珍;蒋守田;王宝琴;王文秀

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;亚洲Ⅰ型;VP1基因;真核表达载体

期刊名称： 中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2005 年 35 卷 06 期

页码： 461-464

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 提取亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒总RNA,用特异性引物通过RTPCR反应获得了约750bp的核酸片段,将其与pGEMTEasy载体连接,并转化大肠埃希氏菌JM109。重组质粒经PCR、酶切鉴定及测序,证明所克隆的片段含有完整的VP1基因;将重组质粒与表达载体pcDNA3.1(+)分别用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后连接,构建成重组表达质粒,转化宿主菌DH5α,筛选阳性克隆。测序结果证明,目的基因正确插入到表达载体中,命名为pcDNAV;用同样方法将IL18基因插入pcDNAV中,命名为pcDNAVI。用pcDNAVI免疫豚鼠,2周后加强免疫1次,每周用ELISA检测豚鼠血清中的抗体水平。结果表明,pcDNAVI可引发机体产生体液免疫。

分类号： S852.65

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