几种蜱MLP基因的表达及其表达产物反应原性的分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 沈辉

作者： 沈辉;刘光远;柴慧萍;田占成;谢俊仁;罗金;张萍;田美媛;殷宏

作者机构：

关键词： 蜱;MLP;原核表达;反应原性分析

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2012 年 08 期

页码： 776-783

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过对饥饿的长角血蜱雌性成蜱cDNA表达文库中筛选到的未知基因进行5′RACE扩增,以期获得长角血蜱MLP基因全长cDNA序列。设计通用引物,采用PCR方法分别从青海血蜱、麻点璃眼蜱、森林革蜱、微小牛蜱及小亚璃眼蜱中对MLP基因完整的开放阅读框进行了扩增,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒,转入BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot分析目的蛋白的表达情况和反应原性。结果表明,成功扩增了长角血蜱的MLP基因全长序列及多个蜱种的MLP基因开放阅读框序列,体外高效诱导表达了约39.2ku的不同蜱的MLP重组蛋白。Western-blot结果表明,长角血蜱的MLP重组蛋白具有很强的反应原性,且不同蜱的重组蛋白间具有很强的交叉反应性。

分类号： S852.746

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