Ⅰ型牛疱疹病毒VP22蛋白原核表达及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭伟强

作者： 郭伟强;段绪来;解佳;赵学亮;刘英楠;陈鸿军

作者机构：

关键词： Ⅰ型牛疱疹病毒;VP22蛋白表达;多克隆抗体制备

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2023 年 44 卷 011 期

页码： 20-25

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)VP22蛋白抗体,选用国内分离株BHV-SHJS,在其UL49基因核酸序列第517至747位间设计引物扩增目的片段,构建pET-28a-UL49(172-249 aa)原核表达载体,转化载体至BL21(DE3)感受态细胞;经IPTG诱导表达并纯化VP22(172-249 aa)融合蛋白后;用该融合蛋白作抗原,以皮下注射的方式免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体;经间接ELISA、Western blot及间接免疫荧光(IFA)方法检测其灵敏度和特异性.结果表明,表达的VP22蛋白以包涵体形式存在;ELISA测定结果显示,制备的VP22蛋白抗体效价达到1:16000;Western blot和IFA结果显示,制备的多克隆抗体能与BHV-SHJS VP22特异性结合,具有良好的反应原性.试验结果为后期BHV-1感染宿主细胞在机制方面的研究和VP22功能的探究奠定了基础.

分类号： S852.659.1%S858.23

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