FMDV结构基因P1的克隆与植物双元表达载体的构建

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王宝琴

作者: 王宝琴;张永光;王小龙;潘丽;王文秀;王永录

作者机构:

关键词: 口蹄疫病毒;P1基因;克隆;三亲融合;双元表达载体;根癌农杆菌

期刊名称: 畜牧与兽医

ISSN: 0529-5130

年卷期: 2005 年 37 卷 09 期

页码: 3-5

收录情况: 北大核心

摘要: 通过RT-PCR法获得阿克苏(Akesu/O/58)FMDV结构基因P1,将该基因克隆到pGEM-T Easy载体进行核苷酸序列测定。将P1基因、Kozak序列等插入中间表达质粒pB in438,构建重组中间表达载体pB inP1。采用三亲融合法构建植物双元表达载体pB inFMDV-P1。结果表明:P1基因为2 208 bp。重组中间表达载体pB inP1经BamHⅠ/SalⅠ双酶切、PCR扩增和序列测定,表明P1基因、Kozak序列等已插入pB inP1。在含50mg/L卡那霉素、25 mg/L链霉素和50 mg/L利福平的YEB培养基上筛选及对融合农杆菌质粒进行P1基因的PCR检测,证明植物双元表达载体pB inFMDV-P1构建正确。

分类号: S852.65

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