人肠道病毒71型类病毒颗粒在家蚕BmN细胞及幼虫体内的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄金山

作者： 黄金山;梁飞;柳林;南文斌;程晨

作者机构：

关键词： 人肠道病毒71型;病毒样颗粒;衣壳蛋白;家蚕杆状病毒表达系统;Bm N细胞;5龄幼虫

期刊名称： 蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2016 年 03 期

页码： 488-493

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 人肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)是近年来暴发危害较严重的手足口病的病原。利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕卵巢培养细胞(Bm N)中共表达EV71病毒衣壳蛋白VP1与VP2,分析二者组装成病毒样颗粒(VLPs)的效率,比较用不同启动子构建重组病毒的表达效果,并利用家蚕幼虫进行2种蛋白质的共表达及VLPs纯化条件的研究。结果表明,重组病毒v Bm Bac-vp1-vp2与v Bm Bac-vp1-IRES-vp2均可介导EV71的VP1、VP2蛋白在Bm N细胞中表达,并能够组装成病毒样颗粒,但采用Pph及Pp10启动子的表达和组装效率明显高于Pph及IRES启动子组合;将重组病毒v Bm Bac-vp1-vp2以1×10~4TCID_(50)/头的剂量注射5龄起蚕,Western blotting检测到VP1在幼虫血淋巴中特异性表达,并且随着感染时间的延长表达量增加;经蔗糖梯度密度离心能够有效地纯化蚕体血淋巴中的病毒样颗粒。研究结果为后续EV71疫苗研制奠定了一定的试验基础。

分类号： R373`Q78

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