猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李建达

作者: 李建达;于江;张玉玉;任素芳;陈蕾;郭立辉;孙文博;陈智;王淞;刘俊珍;杜以军;李俊;杨灵芝;王金宝;吴家强

作者机构:

关键词: 猪链球菌2型;实时荧光定量PCR;敏感性;特异性;重复性

期刊名称: 中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2016 年 43 卷 12 期

页码: 3107-3113

收录情况: 北大核心

摘要: 试验根据猪链球菌2型荚膜多糖(CPS)抗原设计CPS2J基因特异性引物,建立猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法的标准曲线为y=-3.073x+36.87,r=0.995,熔解曲线只有单一的特异峰。敏感性试验显示,该方法可以检测出模板最低浓度为1.0×101拷贝/μL,是普通PCR的10倍;特异性试验显示,对猪链球菌2型具有良好的特异性,能够区分其他血清型猪链球菌和其他细菌;重复性试验变异系数为0.37%~0.63%,均低于2.5%。临床检测显示该方法的敏感性明显高于常规PCR方法和细菌分离的方法。以上结果表明,本研究建立的方法敏感性高、特异性强、重复性好,有利于对猪链球菌2型的快速检测。

分类号: S852.611

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