文献类型: 中文期刊
第一作者: 田李
作者: 田李;徐荣旗;王转斌;刘娜;冯凤鹃;曲志才
作者机构:
关键词: 大丽轮枝菌;分泌蛋白;分泌途径;基因敲除
期刊名称: 微生物学报
ISSN: 0001-6209
年卷期: 2015 年 55 卷 07 期
页码: 873-881
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】验证大丽轮枝菌分泌途径中一个膜泡运输蛋白Vd Sec22的功能,为防治棉花黄萎病提供潜在的生物靶点。【方法】利用"正负双向筛选法"的方法,构建大丽轮枝菌Vd Sec22蛋白编码基因缺失的突变体菌株ΔQF。通过农杆菌介导的转化,将其编码基因Vd Sec22重新导入ΔQF构建了功能回补菌株CΔQF。以野生型菌株为对照,检测上述菌株分泌胞外蛋白(果胶酶、纤维素酶和毒素蛋白)的能力;采用蘸根接种的方法,检测上述菌株对棉花致病性的差异。同时通过定量PCR检测内质网分子伴侣表达量的方法,推断突变体菌株ΔQF中是否发生了内质网应激反应。【结果】成功构建了基因敲除突变体ΔQF和功能回补菌株CΔQF。突变体菌株ΔQF的果胶酶、纤维素酶、毒素蛋白的分泌能力和对棉花的致病性均较野生型减弱,并且产生了内质网应激反应。重新导入Vd Sec22基因可弥补突变体菌株ΔQF的上述缺陷。【结论】Vd Sec22是大丽轮枝菌的一个重要分泌途径蛋白,在大丽轮枝菌诸多胞外致病蛋白的分泌和棉花致病性中起重要作用。Vd Sec22可作为防治棉花黄萎病的潜在生物靶点。
分类号: Q936
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