水稻淀粉分支酶SBE3基因RNAi载体构建及愈伤组织转化影响因素

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨忠良

作者： 杨忠良;徐振华;刘海英;刘会;高洪儒;赵北平;黄翠

作者机构：

关键词： 水稻;淀粉分支酶;RNA干扰;愈伤组织

期刊名称： 黑龙江农业科学

ISSN： 1002-2767

年卷期： 2015 年 08 期

页码： 4-9

摘要： 为了简便、快捷构建RNAi载体,选择了起始点位置相同两个片段构建了SBE3基因的RNAi干扰载体。选择了长度为496bp和803bp,具有不同的酶切位点,其中互补区域形成dsRNA,而长出形成发夹结构,直接克隆到载体pCAMBIA1301上,不需构建中间载体,从而进一步研究SBE3基因在水稻品质改良中的应用。结果表明:所构建RNA干扰表达载体是可行的,相比与常规方法此方法更简便、快捷。同时研究了激素、外植体、继代培养次数、潮霉素因素对水稻愈伤组织诱导效果的影响,结果表明:水稻愈伤组织诱导效果的最佳因素组合是2,4-D浓度2.0mg·L-1,外植体选用下胚轴,继代培养次数在2~4次,潮霉素浓度为20mg·L-1。

分类号： S511

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