蛋鸡J亚群禽白血病病毒分离株SD1009株感染性克隆的构建与病毒拯救

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王琦

作者: 王琦;王永强;康忠惠;高玉龙;潘伟;秦立廷;李久宽;祁小乐;高宏雷;王笑梅

作者机构:

关键词: J亚群禽白血病病毒;感染性分子克隆;病毒拯救;生长特性

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2011 年 11 期

页码: 1111-1116

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为探究蛋鸡J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的致病机理,从山东省某鸡场送检的蛋鸡病料中分离鉴定出1株ALV-J,命名为SD1009株,采用PCR方法分3段扩增出SD1009株的前病毒cDNA,PCR产物经克隆酶切后顺次连接,获得1个含有完整ALV-J前病毒cDNA的重组质粒,命名为pBW-SD1009。全长测序及序列比对分析发现,近年来分离的ALV-J都存在缺失部分rTM和DR区的序列,缺失长度为205bp。通过外源基因嵌合的方式,将205bp嵌合进入,又获得了1个前病毒cDNA的重组质粒,命名为pBW-SD1009A205,将pBW-SD1009和pBW-SD1009A205分别转染DF1细胞,通过间接免疫荧光试验,禽白血病抗原试剂盒检测,反转录酶试剂盒检验,表明拯救出了2株病毒,分别命名为rSD1009和rSD1009A205。本研究成功构建了蛋鸡ALV-J的感染性克隆,并在序列分析的基础上,又构建了第2株补全缺失序列的感染性克隆,结果表明缺失部分rTM和DR区的序列,对病毒的拯救以及病毒的复制动力学无显著影响。

分类号: S852.659.3

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