适用于ATMT介导的RNA干扰载体的构建及在苹果炭疽叶枯病菌中的应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 徐杰
作者: 徐杰;王美玉;王娜;周宗山;张俊祥
作者机构:
关键词: 炭疽病;基因沉默;苹果;农杆菌介导转化;基因
期刊名称: 基因组学与应用生物学
ISSN:
年卷期: 2020 年 009 期
页码:
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 本研究旨在构建1个适用于农杆菌介导真菌遗传转化(ATMT)的RNA干扰载体pCamhybgfp4,为系统研究植物病原真菌基因功能提供便利.通过基因工程及分子生物学技术,将pSilent-1载体的RNAi发夹结构与潮霉素抗性基因(HygR)整合到能被根癌农杆菌识别的T-DNA序列中.以eGFP为靶基因,构建eGFP RNAi载体,并将eGFP RNAi载体转入根癌农杆菌LBA4404,通过ATMT方法,获得eGFP RNAi菌株.绿色荧光检测和定量PCR分析结果显示,eGFP RNAi菌株eGFP无表达或表达量明显降低,表明RNA干扰载体pCamhybgfp4适用于ATMT介导的苹果炭疽叶枯病菌遗传转化.RNAi载体的成功构建为进一步通过RNA干扰技术研究苹果炭疽叶枯病菌致病机制研究奠定了基础.
分类号: S436.611.12
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