猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测标准阳性模板的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张福良

作者： 张福良;靳玉芬;郝贵增;宋长绪;朱道中

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2型;实时荧光定量PCR;模板

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2007 年 37 卷 01 期

页码： 49-53

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用PCR方法克隆了猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因,将构建的重组质粒pMD-ORF2作为PCV2实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测的标准阳性模板,并对该模板进行了酶切及测序鉴定。结果显示,此模板特异性强,稳定性好,-20℃保存20 d无显著变化;对起始浓度为1.0×106、1.0×105、1.0×104拷贝/μL的pMD-ORF2标准品的最终实际测得值分别为1.000×106、0.935×105和0.987×104,其变异系数分别为2.527%、2.067%和2.092%。表明,以此模板进行FQ-PCR具有良好的准确性和重现性。该模板的检测线性范围宽,当稀释度为1.0×109~1.0×105拷贝/μL时,相关系数r=-0.989。

分类号： S854.43

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