感染环形泰勒虫裂殖体的牛淋巴细胞酵母双杂交文库的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 岑双庆

作者： 岑双庆;李有全;刘志杰;陈泽;杨吉飞;关贵全;牛庆丽;任巧云;刘爱红;罗建勋;殷宏;岳城

作者机构：

关键词： 环形泰勒虫;牛淋巴细胞;酵母双杂交;cDNA文库

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 07 期

页码： 667-671

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究环形泰勒虫裂殖体与牛淋巴细胞之间的相互作用,以感染了环形泰勒虫裂殖体的淋巴细胞系为材料,构建了感染环形泰勒虫裂殖体的牛淋巴细胞系的酵母双杂交cDNA文库。首先,提取纯化细胞系的mRNA,经反转录合成第一条链cDNA,通过LD-PCR合成双链cDNA。柱层析剔除250bp以下的小片段;将双链cDNA与经SmaⅠ处理过的文库质粒pGADT7-Rec一起转入到酵母Y187感受态细胞内,双链cDNA与文库质粒会发生同源重组,经过抗性筛选即可得到酵母双杂交cDNA文库。文库构建结果显示,该文库库容量达2.4×107 CFU,插入片段的平均长度在1 000bp左右,达到试剂盒建库要求。

分类号： S852.7

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