人GJB6基因表达载体的构建及鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李丽娜

作者: 李丽娜;张延平;孙玉蕊;张宗林;王戈;张晓强;冯冲;潘登科

作者机构:

关键词: 缝隙连接蛋白30;红色荧光蛋白;融合蛋白表达载体

期刊名称: 中华耳科学杂志

ISSN: 1672-2922

年卷期: 2010 年 04 期

页码: 470-473

收录情况: CSCD

摘要: 目的构建人野生型Cx30与红色荧光蛋白DsRed的融合蛋白表达载体,为揭示Cx30突变患者发病机制提供实验依据。方法用PCR法扩增GJB6基因,将PCR产物与T载体连接,用双切酶酶切pEASY-GJB6与载体DsRed-N1,连接回收后的片断,构建野生型Cx30编码序列与PDsRed2表达载体,测序鉴定序列正确性。将GJB6-DsRed用脂质体转染HEK293细胞,荧光显微镜观察表达的融合蛋白。结果 GJB6-DsRed在HEK293细胞中高效表达,表达主要位于细胞膜中。结论成功构建了人野生型Cx30与红色荧光蛋白DsRed的融合蛋白表达载体,为进一步研究非综合征性聋的致聋机制奠定了基础。

分类号: Q78

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