日本血吸虫磷酸甘油酸变位酶SjPGAM基因的克隆、表达及功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周岩

作者： 周岩;林矫矫;姚利晓;王欣之;石耀军;陆珂;刘金明;傅志强;陶丽红

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;糖酵解;磷酸甘油酸变位酶;克隆

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2008 年 24 卷 09 期

页码： 1550-1555

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyceratemutas)是糖酵解过程中的一种重要酶,主要催化3-磷酸甘油酸转化为2-磷酸甘油酸。利用PCR技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个PGAM家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含753bp,编码250个氨基酸,理论分子量28.26kD,理论等电点7.01。同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型PGAM家族特征,推测为血吸虫的PGAM基因,命名为SjPGAM(GenBank Accession No.EU374631)。实时定量PCR分析显示该基因在14d和19d童虫中的表达量明显高于其他发育阶段,42d雄虫中的表达量高于雌虫。构建了该基因的原核重组表达质粒pET-28a(+)-PGAM,在大肠杆菌系统中成功获得了表达,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别。SjPGAM基因及其表达产物的获得,为探索PGAM基因家族在血吸虫能量代谢过程中碳水化合物转运、新陈代谢调节和生长发育提供了重要基础。

分类号： Q78

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