猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及病毒拯救

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨顺利

作者： 杨顺利;尹双辉;沈小燕;尚佑军;刘湘涛

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2型;感染性克隆;病毒拯救

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2011 年 31 卷 02 期

页码： 169-173+188

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用PCR法扩增猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)全长基因组。将全基因组插入到真核生物表达载体PcDNA3.1的多克隆位点中,获得单拷贝重组质粒P-PCV2和串连双拷贝重组质粒p-2PCV2,将所得质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经7次连续传代后,间接免疫荧光试验显示在细胞中含有病毒抗原。提取mRNA后经RT-PCR检测都有PCV2特异性基因转录。免疫小鼠后,对免疫后不同天数小鼠的血清用ELISA检测,结果到免疫后35 d病毒几乎都能检测到衣壳蛋白特异性抗体,小鼠致死后在其体内也能检测到病毒DNA。结果表明,所构建的2种重组质粒均可表达并在体外组装出有感染性PCV2病毒粒子。为进行PCV2分子特性、疫苗免疫及致病机理研究打下了基础。

分类号： S852.65

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