香蕉束顶病毒海口分离物核穿梭蛋白(NSP)的纯化及抗血清制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 余乃通

作者： 余乃通;冯团成;王建华;刘志昕

作者机构：

关键词： 香蕉束顶病毒;核穿梭蛋白;纯化;抗血清制备

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2010 年 29 卷 02 期

页码： 375-378

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究以本实验室保存的含重组载体pDEST17-NSP的原核表达菌株E.coli BL21(DE3)为材料,于25℃、0.1mmol/L IPTG条件下诱导4h,集菌后超声波破碎,获得以包涵体形式表达的约20kD的融合蛋白。实验结果表明,将沉淀的融合蛋白溶于含6mol/L尿素的Binding Buffer中,再经Ni2+-NTA亲和层析纯化后,可获得高纯度的融合蛋白。将纯化融合蛋白经12%SDS-PAGE电泳,切胶回收目的带,液氮研磨并按1:1(W/V)混合佐剂,4次免疫家兔,获得BBTV病毒核穿梭蛋白的特异性抗血清。以融合蛋白作抗原,间接ELISA法测定其抗血清效价为1:5000。田间检测样品的最佳抗血清工作浓度为1:500。Western Blot鉴定结果表明抗血清能与目的蛋白特异性结合。本研究的结果将为下一步NSP基因转录调控和蛋白功能研究奠定一定基础。

分类号： S436.68

  • 相关文献

[1]香蕉束顶病毒海口分离物Rep基因的克隆、原核表达、抗血清制备及检测. 余乃通,冯团诚,王健华,张雨良,刘志昕. 2011

[2]香蕉束顶病毒海口分离物CP基因的原核表达、纯化及其抗血清制备. 余乃通,冯团诚,王健华,张雨良,刘志昕. 2010

[3]香蕉束顶病毒海南分离物DNA组分的克隆及序列分析. 田娥,庄军,刘志昕. 2004

[4]香蕉分化芽BBTVDAS-ELISA检测方法的建立和应用. 周朋,余乃通,章绍延,王健华,胡加谊. 2014

[5]香蕉两种主要病毒多重PCR检测方法的建立. 彭军,王国芬,黄俊生,代鹏,谢玉萍,李伟东. 2006

[6]香蕉束顶病毒研究新进展. 余乃通,刘志昕. 2011

[7]香蕉束顶病毒单克隆抗体的制备及其应用. 孙茂林,和春育,庄俊英,王宪焘,陈利,李迅东,唐恩华. 1992

[8]香蕉束顶病毒海口分离物Rb蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗血清制备. 冯团诚,余乃通,刘志昕. 2010

[9]香蕉束顶病毒海口分离物基因组的克隆及序列分析. 冯团诚,王健华,刘志昕. 2010

[10]感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价. 谭老喜,张雨良,周朋,章绍延,王健华,张秀春,刘志昕. 2013

[11]香蕉束顶病毒海口分离物NSP基因的原核表达. 冯团诚,王健华,刘志昕. 2009

[12]香蕉束顶病毒海南分离物DNA2编码区的克隆及抗血清的制备. 赵焕阁,牛胜鸟,彭存智,刘志昕. 2008

[13]香蕉束顶病毒DNA组分的克隆及其重要特征序列分析(英文). 黄永红,梅眉,曾继吾,周碧容,吴元立,夏瑞,易干军. 2008

[14]香蕉束顶病毒的提纯. 叶旭东,杨辉,吴如健,陈景耀,柯冲. 1993

[15]利用超低温保存方法脱除香蕉束顶病毒的研究. 曾继吾,牛王翠,黄永红,孙中海,黄秉智,易干军,周碧容. 2009

[16]香蕉束顶病毒nsp酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活验证. 王祥,张秀春,余乃通,梁洁,周朋,刘志昕. 2015

[17]香蕉束顶病毒DNA组分6的克隆及其2个组群分离物的比较分析. 黄永红,梅眉,曾继吾,周碧容,吴元立,夏瑞,易干军. 2008

[18]香蕉束顶病毒cp和mp酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活验证. 王祥,张秀春,余乃通,周朋,梁洁,刘志昕. 2014

[19]香蕉束顶病的酶联免疫吸附检测. 孙茂林,和春育,华秋瑾,陈静,J.E.Thomas. 1990

[20]应用实时荧光定量PCR研究BBTV DNA1在香蕉不同组织中的含量. 周朋,余乃通,章绍延,胡加谊,刘志昕. 2014

作者其他论文 更多>>

微信小程序