犬瘟热病毒N基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达及应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 冯佩平

作者: 冯佩平;张蕾;柴秀丽;张海玲;赵建军;胡博;白雪;高晗;邵西群;闫喜军;赵权;徐磊

作者机构:

关键词: CDV-N蛋白;杆状病毒表达系统;iELISA

期刊名称: 中国生物工程杂志

ISSN: 1671-8135

年卷期: 2012 年 32 卷 04 期

页码: 60-66

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 目的:为检测犬瘟热抗体提供诊断抗原,应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)N蛋白。方法:采用RT-PCR克隆CDV-N基因,构建重组杆粒BacmidCDV-N,并将其转染Sf9昆虫细胞。通过Western blot和间接免疫荧光检测N蛋白的表达。以表达的CDV N蛋白为包被抗原,建立了检测犬瘟热抗体的间接ELISA方法。结果:成功表达了CDV N蛋白。间接ELISA(iELISA)方法中,犬血清最佳稀释度1∶80,N蛋白稀释度1∶40(6.3μg/100μl)。应用该方法共检测了36份犬血清,与中和试验检测方法相比较,其特异性为81.8%,灵敏度为96.0%,符合率为91.7%。结论:表达的CDV-N蛋白具有良好反应原性,建立了快速检测CDV阳性血清的iELISA方法。

分类号: S852.65

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