猪流感病毒NP基因重组复制缺陷型腺病毒的构建与表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 展小过

作者： 展小过;乔传玲;陈艳;杨焕良;孔维;吴运谱;辛晓光;陈化兰

作者机构：

关键词： 猪流感病毒;NP基因;重组腺病毒

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2010 年 30 卷 07 期

页码： 941-944

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以含有猪流感病毒A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)NP基因的重组质粒pMD18-NP为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增NP基因,将其亚克隆至质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有NP及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,构建重组穿梭质粒pDC315-NP-EGFP。利用脂质体转染法将穿梭质粒pDC315-NP-EGFP和腺病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,E3Cre共转染HEK293细胞,基于腺病毒感染后形成的典型细胞病变及EGFP基因在细胞中的表达筛选到重组腺病毒rAd-NP-EGFP。经PCR和Western blotting鉴定,结果表明NP基因已被重组到腺病毒的基因组中,并能够伴随病毒的复制而表达,表达蛋白具有良好的生物学活性。重组腺病毒rAd-NP-EGFP经增殖、纯化后其TCID50可达1.26×1010/mL,为进一步研究该重组病毒的免疫原性奠定了基础。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]表达H3N2亚型猪流感病毒NP基因重组腺病毒的构建. 展小过,乔传玲,陈艳,杨焕良,孔维,吴运谱,辛晓光,陈化兰. 2009

[2]猪流感病毒NP基因的克隆及杆状病毒转移载体的构建. 赵朴,郑玉姝,贾贝贝,乔传玲,陈化兰,刘兴友,李海燕. 2009

[3]表达猪流感病毒血凝素基因的重组腺病毒的构建及免疫原性分析. 汪思钧,廖明,任涛,张春红,黄忠,曹汉威. 2007

[4]表达H3N2亚型猪流感病毒HA基因重组腺病毒对小鼠免疫原性的研究. 展小过,乔传玲,杨焕良,陈艳,孔维,辛晓光,陈化兰. 2010

[5]表达H5N1亚型猪流感病毒HA基因重组腺病毒的构建及其免疫原性. 吴运谱,乔传玲,杨焕良,陈艳,展小过,辛晓光,陈化兰. 2009

[6]四株新城疫病毒NP基因的克隆与序列分折. 刘培欣,刘怀然,石跃,刘胜旺,孔宪刚. 2010

[7]鸡新城疫病毒F48E9强毒株NP基因的序列分析. 陈珍,施少华,程龙飞,傅光华,陈红梅,万春和,林芳,林建生,黄瑜. 2009

[8]两株A型禽流感病毒NP基因的PCR扩增及序列分析. 刘泽文,徐涤平,周平华,段正赢,汪宏才,杨峻. 2004

[9]新城疫病毒F48E9株MNPF和HN基因的真核表达. 闻晓波,闫丽辉,曹殿军,刘培欣,刘春国,步志高. 2006

[10]四株新城疫病毒NP基因的克隆与序列分析. 刘培欣,刘怀然,石跃,刘胜旺,孔宪刚. 2010

[11]犬瘟热病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 杨井泉,韩猛立,朱艳平,黄新,薄新文. 2011

[12]犬瘟热病毒RT-nested PCR检测方法的建立与应用. 王凤雪,闫喜军,柴秀丽,罗国良,张海玲,邵西群,吴威,程世鹏. 2007

[13]鹅副粘病毒NP基因的原核表达及表达产物抗原性检测. 杨玉菊,王君伟,李曦,杨志,何海娟. 2005

[14]马流感病毒NP基因的原核表达及其抗原性分析. 姬媛媛,郭巍,相文华. 2010

[15]禽流感病毒A/goose/China/24/96(H7N3)分离株NP基因片段的克隆及其序列同源性分析. 黄庚明,辛朝安. 2002

[16]新城疫病毒F_(48)E_9株M NP F和HN基因的真核表达. 闻晓波,闫丽辉,曹殿军,刘培欣,刘春国,步志高. 2006

[17]犬瘟热病毒RT-nestedPCR检测方法的建立与应用. 王凤雪,闫喜军,柴秀丽,罗国良,张海玲,邵西群,吴威,程世鹏. 2007

[18]牛副流感病毒3型NP基因原核表达及纯化. 曹丽,高维凡,温永俊. 2014

[19]应用逆转录套式PCR检测禽流感病毒核酸研究. 刘泽文,徐涤平,杨峻,邵华斌,段正赢,山口成夫. 2003

[20]新城疫病毒V4株NP和P基因及其间隔区序列的克隆与分析. 刘芳宁,闫丽辉,曹殿军,刘培欣,杨增岐. 2006

作者其他论文 更多>>

微信小程序