DHV-Ⅰ和DEV双重荧光定量PCR方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 陈肖韩
作者: 陈肖韩;刘海燕;苏世博;赵丽丽;陈洪岩
作者机构:
关键词: Ⅰ型鸭肝炎病毒;鸭肠炎病毒;双重荧光定量
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN:
年卷期: 2021 年 002 期
页码: 169-175
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为建立快速特异的能够鉴别诊断DHV-I和DEV的荧光定量PCR方法,根据NCBI中I型鸭肝炎病毒和鸭肠炎病毒的保守序列,采用Beacon Designer 7.5软件,设计了2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针。接着,对反应条件进行优化,验证其特异性及敏感性。结果,该方法特异性好,对鹅细小病毒、番鸭细小病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、鸭坦布苏病毒、禽网状内皮增生病毒、禽呼肠弧病毒、减蛋综合征病毒、鸭甲肝病毒3型9种病毒检测,均无荧光信号。而且其灵敏度高,对DHV-I和DEV的最小检出量均为200拷贝。利用所建立的荧光定量PCR方法对江苏徐州采集的166份肛拭子进行检测,检出I型鸭肝炎病毒13份(阳性率为7.8%),鸭肠炎病毒75份(阳性率为45%)。上述结果表明,本研究建立了灵敏度高特异性强的DHV-I和DEV双重荧光定量PCR方法。
分类号: S852.65
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