微小牛蜱Bm91基因的原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马米玲

作者： 马米玲;刘军龙;关贵全;刘志杰;郝雪峰;王玙;李有全;刘爱红;任巧云;牛庆丽;殷宏;罗建勋

作者机构：

关键词： 微小牛蜱;Bm91基因;原核表达

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2010 年 31 卷 12 期

页码： 12-15

收录情况： 北大核心

摘要： 根据GenBank收录的微小牛蜱Bm91基因序列设计一对表达引物,以微小牛蜱幼蜱总RNA反转录合成的cDNA为模板,扩增获得了Bm91基因,其长度为1 908 bp,包含一个大小为1 833 bp的完整开放阅读框,编码611个氨基酸,该蛋白预期分子质量为83 ku。将Bm91基因片段亚克隆到原核表达载体pET-30a,构建重组原核表达载体pET-30a-Bm91,转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,发现在0.8 mmol/LIPTG,诱导时间2 h,温度37℃条件下,目的重组蛋白表达量最大,约占蛋白总量的20%。SDS-PAGE检测表明,表达产物为分子质量为83 ku的融合蛋白,与预期大小一致;Western blot分析表明,表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别。

分类号： S852.7

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