茶树ISSR-PCR反应体系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 姚明哲

作者： 姚明哲;王新超;陈亮;杨亚军

作者机构：

关键词： 茶树;ISSR;PCR反应体系

期刊名称： 茶叶科学

ISSN： 1000-369X

年卷期： 2004 年 24 卷 03 期

页码： 24-28+58

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过优化影响茶树 ISSR-PCR 的主要参数,确立了适用于茶树的 ISSR 反应体系和扩增条件。结果表明在 20 μl 反应体系中,模板 DNA、引物、Mg++、dNTP 和 Taq DNA 聚合酶五种主要成分的最适浓度分别为 10ng、150 nmol/L、1.5 mmol/L、150 μmol/L、0.5 U。在扩增过程中,引物的适宜退火温度比其 Tm 值平均高 4.5℃,扩增出足量产物至少需要 30 个热循环。利用该优化反应体系和扩增条件,对 13 份不同茶树种质资源进行ISSR-PCR 扩增,扩增产物的多态性为 77.6%。引物 TRI18 构建的 ISSR 指纹图谱,可以区分 13 份茶树资源中的 12 份,分辨率达 92.3%。

分类号： S571.1

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