长角血蜱MESK基因的克隆及其生物学特性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵波

作者： 赵波;刘光远;罗金;张萍;田占成;谢俊仁;田美媛;王芳芳;袁小松

作者机构：

关键词： 长角血蜱;MESK基因;生物信息学;克隆;真核表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2013 年 08 期

页码： 806-811

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为进一步了解MESK基因在长角血蜱免疫应答中的作用,克隆了长角血蜱MESK基因全长序列,采用有关生物信息学软件对该基因序列的一级结构进行了分析;构建了真核表达载体pEGFP-C1-MESK,采用脂质体转染法在HEK293细胞及HeLa细胞中对其进行了表达。48h后对细胞进行裂解,用兔抗长角血蜱阳性血清与表达出的重组蛋白进行反应,以检测重组蛋白的免疫活性。结果显示,MESK基因全长为1 426bp,包括1个1 185bp的开放阅读框。该基因含有5个N-糖基化位点、5个豆蔻酰化位点、9个酪氨酸蛋白Ⅱ激酶磷酸化位点、1个酪氨酸蛋白激酶位点、2个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、1个蛋白磷酸激酶C磷酸化位点。SDS-PAGE分析及Western-blot分析表明,表达出的重组蛋白的分子质量约为71ku,且以与兔抗长角血蜱阳性血清反应,免疫原性良好。结果表明,MESK基因可以作为一种重要的分子标记参与蜱分类的研究,在作为候选抗蜱疫苗的研究中具有重要的开发价值。

分类号： S852.746

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