利用CRISPR/Cas9技术靶向编辑水稻基因

文献类型： 中文期刊

第一作者： 原文霞

作者： 原文霞;王栩鸣;李冬月;周洁;严成其;陈剑平

作者机构：

关键词： 水稻;CRISPR/Cas9;D3基因;基因编辑

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2017 年 29 卷 05 期

页码： 685-693

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以现有水稻CRISPR/Cas9载体系统为起点,优化改造了相应的载体及其构建方法,实现了两步法构建基因敲除载体。利用新的载体和方法,针对水稻日本晴(Oryza sativa L.spp.Japonica cv.Nipponbare)D3基因的3个靶向位点分别构建了相应的CRISPR/Cas9载体,并通过农杆菌介导的遗传转化成功获得一系列转基因植株。T_0代转基因植株靶位点测序结果显示,靶位点DDRC1包括5种突变类型,植株的突变率为35.48%;靶位点DDRC2包括5种突变类型,植株的突变率为25.00%;靶位点DDRC3包括1种突变类型,植株的突变率为20.00%。利用T_1代纯合突变植株,进一步研究了所得纯合突变体的株高、分蘖数表型与CRISPR/Cas9编辑后基因型之间的关系,探讨了CRISPR/Cas9系统的基因编辑效率、位置效应和突变类型等特点,为进一步利用CRISPR/Cas9系统发展具有不同农艺性状的水稻种质材料提供了参考。

分类号： S511`Q789

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