稳定表达马属动物SAMHD1蛋白的U937细胞系的建立及其抗病毒活性初步研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭苗苗

作者： 郭苗苗;尹鑫;姚秋成;胡哲;王晓钧

作者机构：

关键词： 马;驴;SAMHD1;U937细胞系;HIV-1;EIAV

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2017 年 10 期

页码： 831-835

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究马属动物SAMHD1的抗病毒活性,本研究构建了稳定表达马SAMHD1(eqSAMHD1)、驴SAMHD1(doSAMHD1)的U937细胞系。利用pLPCX慢病毒表达载体构建重组质粒pLPCX-doSAMHD1-HA和pLPCX-eqSAMHD1-HA。将重组质粒和假病毒包装重组质粒(pCgp和pVSV-G)共转染于293T细胞中,制备表达SAMHD1的假病毒,将其感染人急性单核细胞白血病细胞系U937,利用嘌呤霉素筛选,建立了稳定表达doSAMHD1和eqSAMHD1的U937细胞系。经western blot鉴定,该细胞系能够稳定表达doSAMHD1和eqSAMHD1蛋白。将人类免疫缺陷病毒(HIV)和马传染性贫血病毒(EIAV)的假病毒感染该细胞系,结果显示表达eqSAMHD1和doSAMHD1的细胞系均能够显著抑制HIV假病毒复制,限制倍数分别为17~19倍和14~18倍;两种细胞系也能够抑制EIAV假病毒复制,限制倍数分别为3~4倍和2~3倍。该细胞系的建立为进一步评价和研究马属动物SAMHD1的抗病毒机制奠定了基础。

分类号： S852.65

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