光滑型布鲁氏菌LPS单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王加兰

作者: 王加兰;胡森;郑孝辉;范蕾;步志高

作者机构:

关键词: 布鲁氏菌;脂多糖(S-LPS);单克隆抗体

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2009 年 31 卷 08 期

页码: 642-645+649

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为制备抗布鲁氏菌单克隆抗体(MAb),本研究用灭活的布鲁氏菌疫苗M5-90株免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术获得杂交瘤细胞。以布氏杆菌疫苗株M5-90、S-19及小肠结肠炎耶尔森菌O∶9的脂多糖(LPS)分别作为抗原包被酶标板,对杂交瘤细胞进行筛选,获得两株稳定分泌抗光滑型布氏杆菌LPS(S-LPS)MAb的细胞4G6和16C5。特异性分析表明,MAb 4G6除与耶尔森O∶9全菌体有轻微的交叉反应外与其它革兰氏阴性菌无交叉,而16C5完全排除了与其他各菌的交叉反应。Ig亚型分析表明,所制备MAb的轻链亚类均为κ,4G6重链为IgM,16C5重链为IgG3。用Protein G亲和层析纯化MAb 16C5腹水并初步用于竞争ELISA方法,检测布氏杆菌抗体水平,结果表明了该实验方法的有效性。本研究制备的MAb 16C5具有高度的特异性和敏感性,排除了与其他革兰氏阴性菌的交叉反应,为建立一种诊断布鲁氏病的快速、有效、敏感的方法奠定了有力的基础。

分类号: S852.61

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