表达EGFP蛋白新型重组新城疫病毒疫苗载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵冉

作者： 赵冉;齐甜铭;孙军峰;刘怀然;韩宗玺;杨孝朴;刘胜旺

作者机构：

关键词： 新城疫病毒;基因Ⅶ型;绿色荧光蛋白

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2017 年 07 期

页码： 843-849

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建新型新城疫病毒(NDV)载体疫苗,前期我们将La Sota全长c DNA中的F基因编码区替换为基因Ⅶ型NDV的F基因编码区,并将其裂解位点突变为弱毒株的序列,构建获得了p NDFLSP-m F重组质粒。为探索p NDFLSP-m F是否能够作为载体有效地表达外源蛋白,在p NDFLSP-m F的P基因与M基因之间引入PmeⅠ酶切位点,并将EGFP基因编码区克隆至构建好的p NDFLSP-m F载体中,构建含有EGFP基因的重组质粒p NDFLSP-m F-EGFP。将p NDFLSP-m F-EGFP以及辅助质粒p CI-NP-K、p CI-P-K、p CI-LK共转染表达T7 RNA聚合酶的重组痘病毒预感染的BSR-T7/5细胞,拯救获得了重组病毒La Sota-m FEGFP。通过RT-PCR证明,被拯救的重组病毒中含有插入的外源基因EGFP。荧光观察和Western-blot分析结果表明,EGFP蛋白能在重组病毒中稳定表达。生物学特性测定结果显示,La Sota-m F-EGFP具有低毒力毒株特征,MDT为144 h,能够在鸡胚上有效地复制,EID50为1×108.75/0.1 m L。上述研究结果为研制和开发新型NDV载体疫苗奠定了基础。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]新城疫LaSota活疫苗对基因Ⅶ型分离株的免疫保护性试验. 胡北侠. 2013

[2]鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及其生物学特性的研究. 王敏,付祖权,刘晓丽,谷长勤,张万坡,胡薛英,温国元,程国富. 2017

[3]基因Ⅶ型新城疫病毒融合前构象F蛋白的表达及结构分析. 陈林娜,孙军峰,李乐,师乾凯,邸涛,刘添仪,赵冉,张春玮,韩宗玺,刘胜旺. 2021

[4]表达新城疫病毒融合蛋白基因禽痘病毒重组体的构建. 黄兵,于可响,高月花,宋敏训,牟建青,李峰. 2006

[5]新城疫LaSota活疫苗对基因Ⅶ型分离株的免疫保护性试验. 胡北侠,杨少华,许传田,张琳,黄艳艳,张秀美. 2012

[6]鸡新城疫基因Ⅶ型灭活标记疫苗(MG7株)最小有效免疫剂量的研究. 罗琼,李延鹏,王宏飞,同戈,张晓楠,朱启运,李慧敏,陈瑞爱. 2017

[7]鸭源副粘病毒Y03株F基因的克隆及序列分析. 张青娴,李银,张敬峰,刘宇卓,鲍恩东. 2006

[8]反向遗传技术致弱的基因Ⅶ型新城疫病毒对SPF鸡的免疫效力评价. 刘涛,吉艳红,贾艳娥,朱启运,李郁. 2017

[9]重组基因Ⅶ型新城疫病毒疫苗候选株的构建. 周洁,孙慧敏,董嘉文,李林林,张俊勤,黄允真,汪招雄,孙敏华. 2022

[10]嗜水气单胞菌在浸泡感染团头鲂的组织动态分布. 陆春云,谢骏,习丙文,梁利国,夏飞,潘良坤. 2015

[11]表达绿色荧光蛋白基因的花鲈胚胎干细胞株的建立及其体外分化. 叶寒青,陈松林,刘洋,沙珍霞. 2006

[12]羊BLG基因5′和3′调控区克隆及其调控GFP基因在乳腺细胞的表达. 刘明军,李文蓉,武坚,黄俊成,郭志勤,曲新勇,Paul Kroon. 2002

[13]半滑舌鳎vasa调控区的克隆、表达载体构建及其驱动活性检测. 黄进强,陈松林,邵长伟,刘洋,林帆,李亚亚,王娜. 2015

[14]GFP标记生防细菌B579及其定殖能力检测. 杨秀荣,田涛,孙淑琴,刘亦学. 2013

[15]构建香菇转化的同源筛选标记的研究. 李菲,章炉军,姜宁,刘建雨,于海龙,尚晓冬,宋春艳,谭琦. 2019

[16]利用荧光观测明确载球孢白僵菌松毛虫赤眼蜂对亚洲玉米螟的防控增效作用. 杨芷,路杨,张庆贺,毛刚,徐文静,赵宇,隋丽,崔璐璐,张正坤,李启云. 2020

[17]电击法转化金针菇菌丝碎片表达报告基因eGFP及GUS的研究. 刘建雨,张美彦,张丹,徐珍,宋春艳,李巧珍,尚晓冬,谭琦,黄志勇,胡卫红,张引芳,赵静,王瑞娟. 2018

[18]水稻白叶枯病菌hrpF启动子序列调控的绿色荧光蛋白基因表达体系的构建. 刘莉,付月灵,简桂良,齐放军. 2008

[19]小鼠胚胎母源基因转向合子基因组的转换起始点. 肖红卫,华文君,华再东,任红艳,张立苹,郑新民,朱喆,毕延震. 2019

[20]利用绿色荧光蛋白GFP研究稻瘟病菌与水稻的互作. 许有嫔,廖海澄,陈金华,罗櫞,宿加,邹成东,李伟滔,王静,马炳田,贺闽,陈学伟. 2017

作者其他论文 更多>>

微信小程序