边缘无浆体MSP5基因序列分析及其融合蛋白的纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马米玲

作者： 马米玲;殷宏;李有全;高金亮;关贵全;刘志杰;刘爱红;刘军龙;任巧云;罗建勋

作者机构：

关键词： 边缘无浆体;MSP5基因;序列分析

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2008 年 29 卷 08 期

页码： 13-16

收录情况： 北大核心

摘要： 参照已发表的主要表面蛋白5(MSP5)基因的核苷酸序列,设计了一对特异性引物,以边缘无浆体基因组DNA为模版,采用PCR技术扩增获得了MSP5基因;将其克隆到pGEM-T Easy载体,并进行测序分析,结果表明,克隆的MSP5基因与GenBank上登录的Florida株MSP5基因的序列同源性达98.6%,编码氨基酸的同源性为99%,并且该序列包含有完整的开放阅读框,大小为633 bp。将该基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组原核表达载体。将其转化到DH5α宿主菌中,用IPTG进行诱导表达,实现了融合表达,表达产物的分子质量为45 ku。Western blot分析表明,此表达产物能够被抗边缘无浆体阳性血清所识别。通过裂解、洗涤、变性、复性等方法对包涵体蛋白进行处理,获得的纯化产物浓度为1 mg/mL。

分类号： S852.64

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