重组NP蛋白抗原检测SIV抗体间接ELISA方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王方昆

作者: 王方昆;袁秀芳;刘思当;张存;徐丽华;王一成

作者机构:

关键词: 猪流感;重组NP蛋白;ELISA

期刊名称: 浙江农业学报

ISSN: 1004-1524

年卷期: 2008 年 20 卷 06 期

页码: 408-413

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 用纯化的H9N2亚型猪流感可溶重组NP蛋白作为包被抗原,建立了检测猪流感抗体的间接ELISA方法。ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为12.5μg/mL,37℃1 h,4℃过夜;血清稀释度为1∶40;酶标SPA稀释度为1∶10 000,37℃温育40 min,底物显色37℃15 min。经重复性试验、交叉试验、竞争抑制试验等试验,结果表明该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。利用TG-ROC软件确定了自制ELISA(NP-ELISA)酶标板的临界值为0.20,特异性和敏感性分别为95.83%和91.43%。与美国IDEXX试剂盒相比较,符合率为94.00%,无显著性差异。用已建立的ELISA方法检测临床血清样本356份,总阳性率为35.40%。

分类号: S854.43

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