不同基因型鹅星状病毒鉴别诊断RT-PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王宏宇

作者： 王宏宇;朱寅初;云涛;华炯钢;叶伟成;倪征;陈柳;张存

作者机构： 浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 鹅星状病毒;一步法RT-PCR;基因型;检测方法

期刊名称： 浙江农业科学

ISSN： 0528-9017

年卷期： 2021 年 62 卷 011 期

页码： 2299-2302,2309

摘要： 鹅星状病毒(GAstV)是近年临床新发病原,也是导致当前雏鹅痛风致死的主要病因,研究显示该病毒存在两种不同基因型.为建立快速准确的核酸鉴别诊断方法,本研究针对不同基因型GAstV保守域RNA依赖性RNA聚合酶序列各设计1对特异性引物,建立以RNA为模板的双重一步法RT-PCR检测方法.条件优化试验结果显示,双重RT-PCR方法彼此无干扰;引物特异性强,对坦布苏病毒、鹅细小病毒、呼肠孤病毒、鸭瘟病毒的检测均为阴性;体系中引物适宜浓度为1μmol,退火温度范围广,50~54℃皆可;敏感性高,最低检测限分别为103拷贝数和102拷贝数.对采集自江浙地区的73份样品进行检测,结果显示,鹅星状病毒阳性率为93.2%,主要为Ⅱ型星状病毒的单一感染(阳性率86.3%),部分样品呈现两种类型星状病毒混合感染现象(阳性率6.8%).上述结果表明本研究建立的双重RT-PCR方法可用于GAstV的鉴别诊断和分子流行病学调查.

分类号： S858.32

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