梅花鹿Fibulin 5编码区cDNA的克隆及功能研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 褚文辉

作者: 褚文辉;王权威;王玉俗;王桂武;李春义

作者机构:

关键词: 梅花鹿;鹿茸;FBLN5;生物信息学分析;干扰;血管生成

期刊名称: 兽类学报

ISSN: 1000-1050

年卷期: 2019 年 2 期

页码: 172-181

摘要: 为研究梅花鹿扣针蛋白5(Fibulin 5, FBLN5)在鹿茸再生过程中的作用,本研究通过RT-PCR获得了梅花鹿FBLN 5的cDNA编码区,并对其进行生物信息学分析.同时利用RNA干扰技术(RNA interference, RNAi)下调了梅花鹿角柄骨膜致敏区(Potentiated pedicle periosteum, PPP)细胞中FBLN5基因表达,并研究了基因表达下调后PPP细胞条件培养液对HUVEC细胞增殖的影响.结果显示:(1)梅花鹿FBLN5 cDNA编码区长1 347 bp,编码448个氨基酸;(2)生物信息学软件分析显示,梅花鹿FBLN5蛋白含有一个跨膜区,一段23个氨基酸的信号肽序列,vWA_Matrilin、cEGF和EGF_CA等重要的功能结构域;(3)构建了梅花鹿FBLN5基因的RNAi重组质粒并获得了一条能有效下调目的基因效率达88.72%的靶序列pLVTHM-FBLN2,MTT结果显示PPP细胞FBLN5基因表达量下调后,所获细胞条件培养液可显著促HUVEC细胞增殖,推测FBLN5可能参与了鹿茸再生过程中的血管生成及稳态维持等过程.

分类号: S825

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