文献类型： 中文期刊
第一作者： 傅强
作者： 傅强;仇旭升;陈素娟;谭磊;宋翠萍;于圣青;丁铲;彭大新
作者机构：
关键词： 新城疫病毒;V蛋白;蛋白表达;多克隆抗体;细胞嗜性
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2013 年 35 卷 09 期
页码： 702-706
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 新城疫病毒(NDV)的V蛋白是一种干扰素拮抗蛋白,该蛋白表达量的差异对NDV细胞嗜性的影响是目前的热点问题。为制备NDV V蛋白多克隆抗体,本研究以Class I NDV 9a5b株和Class II NDV ZJ1 P基因为模板扩增V蛋白PNT结构域和V蛋白半胱氨酸富集区(CTD)结构域,分别克隆至pET-28a(+)载体和pCold TF载体中,获得表达V蛋白或其CTD结构域的重组表达质粒。将重组质粒转化大肠杆菌诱导表达;纯化重组蛋白,并分别免疫小鼠,制备针对Class I和Class II NDV V蛋白的多克隆抗体。利用该多克隆抗体,western blot检测NDV 9a5b、La Sota、ZJ1、Herts/33株感染HeLa和DF1细胞后V蛋白的表达量变化。结果显示制备的多克隆抗体可以用于NDV V蛋白的检测,V蛋白在易感宿主禽源细胞中的表达量明显高于哺乳动物细胞。研究表明NDV V蛋白的表达水平与宿主细胞的种属差异相关。
分类号： S852.65
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