竹黄菌原生质体的制备与再生分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 魏洪美
作者: 魏洪美;任锡毅;杨兵;黄青青;刘永翔;乙引
作者机构:
关键词: 竹黄菌;原生质体制备;原生质体再生;正交试验
期刊名称: 基因组学与应用生物学
ISSN: 1674-568X
年卷期: 2016 年 35 卷 04 期
页码: 918-923
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了提高竹黄菌(Shiraia bambusicola P.Hennings)中原生质体用于遗传转化时的转化效率,研究竹黄菌原生质体制备及再生的最佳条件,建立竹黄菌原生质体的高效遗传转化体系。本研究以竹黄菌为材料,采用正交试验分析方法,对影响竹黄菌原生质体制备及再生的主要因素,不同酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂及菌龄、不同再生培养基等进行了系统的研究。结果表明,以0.6 mol/L Na Cl为稳渗剂,用组合酶(质量分数1%裂解酶和质量分数1.5%崩溃酶按4:6体积比混合)在33℃条件下对菌龄为6 d的菌丝体酶解2 h,原生质体产量最高,达到10.57×10~6个/m L;以0.6 mol/L蔗糖为稳渗剂,用组合酶(质量分数1%裂解酶和质量分数1.5%崩溃酶按4:6体积比混合)在29℃条件下对菌龄为4 d的菌丝体酶解2 h,原生质体再生率最高,为0.293%;最适合竹黄菌原生质体再生的培养基是TB3再生培养基。
分类号: Q93
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