马铃薯X病毒外壳蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建
文献类型: 中文期刊
第一作者: 李广存
作者: 李广存;杨煜;王秀丽;高常勇;陈利容;毕玉平;王毅
作者机构:
关键词: 马铃薯X病毒;外壳蛋白基因;RT-PCR;序列分析
期刊名称: 中国马铃薯
ISSN: 1001-0092
年卷期: 2002 年 16 卷 05 期
页码: 259-262
摘要: 将来源于国际马铃薯中心 (InternationalPotatoCenter ,ClP)PVX病毒毒源接种至烟草上 ,对表现明显症状的烟草叶片提取马铃薯病毒X (PVX)总RNA ,人工合成引物P1、P2 ,通过RT PCR扩增合成PVX cp的cDNA ,井将其克隆到pGEM T载体上。经限制酶谱分析后进行全序列测定 ,结果表明 :该基因由 714个核苷酸组成 ,编码 2 38个氨基酸 ,与文献 (分别来源于亚洲、非洲和欧洲 )报道的 4个 pVX cp基因相比同源性为 81%~ 95 % ,其编码的氨基酸同源性均在 90 %以上。说明PVX cp具有较高的保守性。用内切酶将PVX cp基因自克隆载体 pGEM切下 ,定向插入到表达质粒 pBV2 2 0的启动子Pr、Pl的下游 ,构建了该基因的原核表达载体pBV pvx ,为进行该基因的原核表达和抗血清的制备奠定了基础。
分类号: S435.32
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