H5N1禽流感病毒NA基因重组腺病毒表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王青

作者： 王青;胡建和;徐彦召;朱国坡;宋涛;李任峰

作者机构：

关键词： 腺病毒载体;AIV H5N1亚型;NA基因;载体构建

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2010 年 31 卷 06 期

页码： 15-19

收录情况： 北大核心

摘要： 构建携带有H5N1亚型AIV NA基因的重组腺病毒表达载体,为进一步研究AIV中NA基因在病毒致病过程中的作用及相关诊断试剂的开发提供依据。采用PCR的方法从构建好的包含有H5N1AIV NA基因的pMD-19T-N1质粒中扩增出NA基因,定向插入pAdtrack-CMV腺病毒穿梭质粒中,含有目的基因的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-N1与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在基因工程菌BJ5183中进行同源重组,获得腺病毒质粒pAdeasy-N1,将pAdeasyd-N1经pacⅠ线性化后转染HEK293细胞株,包装出含有NA基因的腺病毒pAd-N1。结果表明,构建含有目的基因的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-N1和含有目的基因的腺病毒质粒pAdeasy-N1经PCR、双酶切及核苷酸测序测定无误。线性化后的pAdeasy-N1转染HEK293细胞,成功获得腺病毒pAd-N1载体,经绿色荧光蛋白和RT-PCR分析证实,目的基因在该细胞中成功表达。

分类号： S852.659.5

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