鸭β-防御素4cDNA的克隆、表达及其抑菌活性的初步分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蔺利娟

作者： 蔺利娟;韩宗玺;邵昱昊;张可心;刘胜旺;李子瑞;马得莹

作者机构：

关键词： 鸭;AvBD4;重组蛋白;抗菌活性;组织分布

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2011 年 42 卷 09 期

页码： 1309-1315

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在克隆与表达鸭β-防御素4(AvBD4)基因及测定其生物学特性,并检测其在鸭脏器组织中的分布。采用RT-PCR方法从鸭法氏囊组织中扩增到鸭AvBD4,其cDNA大小为171bp,编码56个氨基酸。经同源性分析,鸭AvBD4与鸡AvBD4的氨基酸序列同源性最高,达73.2%。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX-duck AvBD4。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃进行诱导表达,SDS-PAGE电泳表明,重组鸭AvBD4蛋白的相对分子质量约为32ku,与预期大小一致。该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性与理化特性,结果显示,重组鸭AvBD4蛋白具有广谱的抗菌活性,对11种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌作用。在高盐离子条件下,重组鸭AvBD4蛋白仍具有抑制金黄色葡萄球菌和多杀性巴氏杆菌的作用。此外,该重组蛋白的溶血活性极低。运用实时荧光定量PCR法检测到该基因在鸭组织器官中表达局限,仅在盲肠扁桃体、脾脏和法氏囊中表达。

分类号： S858.32

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