鹅坦布苏病毒非结构蛋白NS5的原核表达及特性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩凯凯

作者： 韩凯凯;李银;黄欣梅;赵冬敏;刘宇卓;刘青涛;谢星星;安凤娇

作者机构：

关键词： 鹅坦布苏病毒;NS5蛋白;原核表达

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2015 年 27 卷 10 期

页码： 1704-1709

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过在大肠杆菌中表达鹅坦布苏病毒非结构蛋白NS5对其纯化,并进行特性分析。根据鹅坦布苏病毒JS804株非结构蛋白NS5基因序列,设计1对特异性引物,利用PCR技术扩增得到全长NS5基因序列,并将其定向克隆至原核表达载体p ET32a中,获得重组表达质粒p ET32a-NS5,经双酶切鉴定及测序正确后,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。经IPTG诱导表达,表达的重组融合蛋白最终经SDS-PAGE及Western-blotting鉴定。结果显示,NS5融合蛋白分子质量约为120 ku,在诱导后5 h达到表达量高峰,融合蛋白以包涵体形式存在,Western-blotting显示原核表达的蛋白可被兔抗鹅坦布苏病毒血清特异性识别,表明以NS5蛋白为抗原制备的多克隆抗体具有较高的敏感性与特异性。

分类号： S852.65

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