短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX超氧化物歧化酶基因的克隆及原核表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 车建美

作者: 车建美;马桂美;刘波;刘国红;陈倩倩

作者机构:

关键词: 短短芽胞杆菌;超氧化物歧化酶;基因;克隆;表达

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2017 年 08 期

页码: 1501-1506

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX具有抑菌、抗褐变和保鲜功能。以短短芽胞杆菌菌株FJAT-0809-GLX总DNA为模板,采用PCR扩增超氧化物歧化酶(Supseroxide dismutase,SOD)基因,将该片段纯化回收后与p MD18-T连接并转入大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,进行序列测定,结果显示SOD基因序列长度为609 bp(Gen Bank登录号:KM255665),编码202个氨基酸残基。将SOD基因片段与同样酶切的表达载体p ET-28a连接,构建重组表达载体p ET-28a-SOD,转入大肠杆菌BL-21,采用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)进行诱导表达。SDS-PAGE结果表明,在菌体中存在约25 ku的蛋白表达产物,与该基因ORF预期大小接近。以上结果为进一步研究该酶的生理生化特性奠定了基础。

分类号: Q78`Q936

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