人结核分枝杆菌特异性核酸探针制备及结核病PCR检测技术的初步临床应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蔡宏

作者： 蔡宏;陈东;徐治新;李君莲;周文来

作者机构：

关键词： 人结核分枝杆菌;特异性核酸探针;PCR;结核病检测

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 1996 年 04 期

页码： 95-99+147

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用人结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberulosis TB)染色体DNA为模板,选择位于插入片段IS6110中884～865和568～588碱基对处的两个片段为引物,扩增出317bp的特异性片段,将其克隆进pUC19载体。酶切图谱分析和DNA序列测定证实为目的片段。该片段经DIG标记,分别与11种分枝杆菌DNA进行Southern杂交,结果证明只与人型复合分枝杆菌发生杂交反应。利用该对引物建立的PCR检测技术对74份结核病痰液标本进行检测,并与临床细菌快速培养结果相比较,发现48份临床阳性均为PCR阳性,在26份临床阴性标本中亦发现11份PCR检测阳性。将标本PCR产物与克隆探针进行杂交,显示两者结果完全一致。说明PCR检测体系结果可靠,其灵敏度明显高于目前临床所采用的方法,可作为一种常规技术用于结核病的临床检测。

分类号： R346

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