中药金银花体外抗牛病毒性腹泻病毒的作用研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘占悝

作者： 刘占悝;李智杰;刘泽余;李健友;张淑琴;王超;郭利

作者机构：

关键词： 金银花;牛病毒性腹泻病毒;抗病毒作用;细胞活性;免疫荧光;50','') >TCID50;荧光定量PCR

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2020 年 014 期

页码： 116-120,154-155

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究中药金银花是否具有抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)活性的作用,试验首先测定了金银花对牛肾细胞(MDBK细胞)的最佳用药浓度,用该浓度的金银花对在细胞内和细胞外两种状态的BVDV进行试验.细胞外试验中,把BVDV与金银花在体外混合,作用0,6,12 h后接种MDBK细胞,以研究金银花在细胞外抗BVDV活性作用.细胞内试验中,将BVDV先接种至MDBK细胞,然后用含金银花的细胞维持液培养1 h,最后用细胞维持液继续培养24,36,48 h,以观察金银花对BVDV复制的影响.采用免疫荧光试验、病毒半数组织细胞感染量(TCID50)测定及荧光定量PCR方法,检测金银花对BVDV活性和复制的影响.结果表明:当金银花浓度为2.5*10-2 g/mL时,对细胞的毒性最小.因此,用该浓度的金银花对BVDV在细胞内和细胞外两种状态进行试验.细胞外试验组免疫荧光试验结果显示,金银花与BVDV作用0 h,培养72 h后,仍有特异性荧光;而金银花与BVDV作用6 h和12 h,培养72 h后则无特异性荧光出现,表明在细胞外金银花对BVDV活性起到了良好的抑制作用.随着金银花与BVDV在体外作用时间的增加,病毒对照组TCID50极显著高于试验组(P<0.01).BVDV与金银花作用0,6,12 h后感染细胞,试验组与病毒对照组样品中BVDV mRNA相对含量均差异极显著(P<0.01).细胞内试验组免疫荧光试验结果显示,金银花作用24 h样品仍有少量特异性荧光,而作用36 h和48 h样品则无特异性荧光.随着金银花与BVDV作用时间的增加,病毒对照组TCID50逐渐增大;而试验组TCID50基本不变,与病毒对照组差异极显著(P<0.01).细胞内的BVDV与金银花作用36,48 h后,试验组与病毒对照组样品中BVDV mRNA相对含量差异极显著(P<0.01).说明金银花可对细胞内外的BVDV活性起到良好的抑制作用,可以抑制BVDV的活性.

分类号： S853.74

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