绵羊羊水干细胞外源基因高效转染及快速筛选方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王凤武

作者： 王凤武;郝斐;魏著英;刘东军;荣威恒

作者机构：

关键词： 绵羊;羊水干细胞;报告质粒;基因转染;高效转染;快速筛选

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2013 年 40 卷 11 期

页码： 16-20

收录情况： 北大核心

摘要： 试验旨在建立绵羊羊水来源多潜能干细胞(amniotic fluid-derived stem cells,AFSC)外源基因高效转染及快速筛选方法,同时保持其多潜能特性。采用脂质体法,以pCMV-DsRed为报告质粒,转染绵羊AFSC,36h后,流式细胞仪分析外源基因的瞬时转染效率为69.17%。以浓度为6 mg/mL的G418筛选5h获得纯化转基因绵羊AFSC单克隆。转基因绵羊AFSC RT-PCR检测表达Oct-4、SSEA-1,体外悬浮培养可形成类胚体。结果表明,转基因标记绵羊AFSC保持了发育全能性的潜能,构建的转基因绵羊AFSC可以示踪性研究其在体内的分化路径和最终宿主。

分类号： S826

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