花生Δ~9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因启动子的克隆及功能分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 石磊
作者: 石磊;苗利娟;齐飞艳;张忠信;高伟;孙子淇;黄冰艳;董文召;汤丰收;张新友
作者机构:
关键词: 花生;Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因(SAD);启动子;基因组步移;GUS报告基因
期刊名称: 作物学报
ISSN: 0496-3490
年卷期: 2016 年 42 卷 11 期
页码: 1629-1637
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: Δ~9-硬脂酰-ACP脱氢酶(SAD)是决定植物体内饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸比值的关键酶。以花生品种豫花9326基因组DNA为模板,通过基因组步移技术,克隆到花生Δ~9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因(Ah SAD)起始密码子ATG上游720 bp片段,利用5'RACE方法获得了该基因的5'UTR序列,通过序列比对确定720 bp片段为Ah SAD启动子区域。PLACE在线启动子预测分析表明,该序列具有真核生物启动子必需的核心元件TATA-box和CAAT-box,含有多个与光诱导和激素响应相关顺式序列元件。将Ah SAD启动子片段替换pBI121质粒中的CaMV35S启动子驱动下游GUS基因表达,构建植物表达载体pBI-PAh SAD。通过农杆菌介导法转化拟南芥和在花生不同组织中瞬时表达,利用GUS组织化学染色研究其表达特性。表明在拟南芥和花生受体中,AhSAD启动子主要调控下游基因在根、茎、叶片和子叶中表达,在花生的果针中也检测到GUS活性;拟南芥的茎生叶只有叶脉中具有GUS活性,而花生整个叶片中都具有GUS活性。
分类号: S565.2
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